蝦蝦@Aquarium

摘錄From http://tw.myblog.yahoo.com/biopesticides-hsieh/archive?l=f&id=50

Q2: 請告知枯草桿菌如何運用?一般自製有機肥，須注意那些事項‧

Ans: 枯草桿菌目前市面上可以買到的生物農藥劑型主要可分為液劑與粉劑.

使用方法一般為直接加水稀釋並依照廠商說明書進行即可.並不需要幾個小時或隔夜浸泡.

但市面上可以選擇的枯草桿菌生物農藥廠牌並不多......,因為有些廠商因法令等問題而將枯草桿菌暫時歸類在土壤添加劑或土壤改良劑.

因此若枯草桿菌用於有機堆肥或生物肥料,則類似固態發酵,建議您可請教中興大學土壤系楊秋忠教授或台中區農業改良場的陳俊位副研究員.

Q3: 使用枯草桿菌能夠同時再添加其它有益菌,例如內生菌根菌,蘇力菌,放線菌或木黴菌嗎?是否會產生拮抗作用?

Ans: 枯草桿菌確實會對一些細菌或真菌產生拮抗作用.

但由於枯草桿菌的菌株不同,所產生的抑菌程度也隨之不同,因此您目前使用的枯草桿菌是否會抑制到您也正在使用的菌根菌或其它菌種,必須做實驗才能有較完整的答覆.

一般建議不要貿然添加不同的菌種.

因此,誠懇建議您直接詢問提供給您枯草桿菌的廠商或是到農委會藥毒所進一步討論.

Q4: 枯草桿菌可以防治什麼植物病害?

Ans: 枯草桿菌不僅可以直接噴灑植物葉片來保護葉部真菌病害，例如菜豆銹病，亦可施用於土壤或做種子拌種處理以預防土壤病害，其對多種作物之生長，尤其是根部之發育，有極為明顯之促進作用，還可做為蔬果採收後防止腐敗的抗真菌劑，例如桃褐腐病與柑橘青黴病等。

多年來有關枯草桿菌的研究開發，大都著重在土壤傳播性病害方面，例如許多相關學術研究機構已證實具應用潛力之病害標的包括康乃馨莖腐病（Fusarium roseum）、玉米苗枯病（F. roseum）、甜菜舞病（Rhizoctonia solani）、洋蔥白腐病（Sclerotium cepivorum）、菊花莖腐病（R. solani）、蘋果癌腫病（Agrobacterium tumefaciens）、葡萄枝枯病（Eutypa lata）、楓樹黃萎病（Verticillium dahliae）以及柑橘綠黴病（Penicillium digitatum）等。

另外，中興大學植病系篩選到BS1菌株，該系經溫室與田間試驗測試，證實其對於菸草白星病（Cercospora sp.）、茄科作物細菌性葉斑病（Xanthomonas axonopodis pv. vesicatoria）、芒果細菌性黑斑病（X. campestris pv. mangifera-indicae）以及山蘇、蟲草與山藥等作物白絹病（Sclerotium rolfsii）之防治，效果均明顯優於推薦推廣之化學藥劑。另外，該系經由人工接種測試初步證實，對水稻栽培上近年來極受重視的白葉枯病（X. oryzae pv. oryzae）危害，亦有很好的防治效果。尤其，對蘭科植物、豆科作物、青心烏龍茶樹、金線蓮等，生長促進作用均相當明顯，產量亦優於未處理者。

但要注意的是，不但植物病原菌會有差異，不同枯草桿菌菌株的有效成分種類與含量也有所不同，所以不同廠牌或公司生產的枯草桿菌製品的防治對象常不相同，防治效果也可能差異很大，而且廠商宣稱的某種病害防治效果不一定能完全適用於您的需求，也就是說，可能對別人有效卻對您沒效。田間施用存有許多影響因素，必須與供應廠商或農業專家密切聯繫與詢問。

目前市面上核准的國內生物農藥--枯草桿菌產品，暫時只有百泰的台灣寶，其餘都還在申請審核中。許多公司例如福壽或台肥等，是以土壤添加劑或生物堆肥，而不是用生物農藥的包裝來販售。

目前可以選擇的廠牌並不多，若是農友要施用，還是建議直接與廠商聯繫細節。

Q5: 枯草桿菌可以防治土壤線蟲嗎?

Ans: 枯草桿菌目前文獻記載的幾乎都是殺菌或抑菌作用,所以枯草桿菌病似乎還沒有殺線蟲的研究報告.

但是另一種微生物殺菌劑---放線菌已經有殺線蟲的研究報告,如果您確認是植物線蟲引起的問題,建議可與中興植病系的 蔡東纂 教授連絡(可上網查到聯絡方式).

Q8: 請問要到哪裡購買枯草桿菌 ?

Ans: 葉面噴灑或根部澆灌做為生物農藥用的商品,建議可連絡百泰,興農或沅渼公司.

生物堆肥或土壤改良添加劑的商品,建議可連絡福壽或台肥公司.

當然應該還有其他公司商品,因為篇幅有限無法一一查詢列出.

以上公司的聯絡方式請直接上網查詢即可.

另外,有些學校或研究機構也有進行枯草桿菌研發,但因為大多不是商品,所以提供測試數量應該都不會太多,仍建議先使用市面能夠買到的商品試試看再說.

Q10:那裡有生產枯草桿菌的豐原素 Fengycin?

Ans:枯草桿菌可以產生多種抗生物質，部份枯草桿菌菌株會產生fengycin。目前市面應該買不到純化的fengycin。長庚大學的劉世東教授實驗室有進行相關研究，您可去電詢問。

Q11:枯草桿菌可否放在堆肥或廚餘內?

Ans:枯草桿菌一般生長條件約在攝氏30度至37度左右，但產生孢子可耐熱攝氏60度至少30分鐘，甚至100度以上。因為可產生蛋白質分解酵素與脂質分解酵素等多種代謝物質，常添加在堆肥或廚餘內。

Q12:枯草桿菌是否有促進植物生長的作用?

Ans:枯草桿菌生物製劑為一具拮抗多種病原微生物及促進植物生長之有益微生物製劑。 

目前國內外對於枯草桿菌促進作物生長的報告並不是很豐富，以下各列舉一篇提供您參考：

1. http://tdares.coa.gov.tw/htmlarea_file/web_articles/tdais/712/81-6.pdf

2.http://www3.interscience.wiley.com/journal/112636072/abstract?CRETRY=1&SRETRY=0

由於我目前的研究內容主要是植物病害的防治，至於有關促進作物生長的研究工作仍在初步研究階段，若未來能有進一步的成果或發現，再與各位分享。

Q13：枯草桿菌要施用幾次才會有效果?

Ans：不要只用1次，就急著要看到明顯的藥效，要改變以往使用化學農藥的觀念。若每星期施用1次，必須要長期連續使用至少3次以上才能逐漸發揮效果，也才能根據施用結果來評估是否有效。

 要強調的是，蘇力菌或其它殺蟲製劑的殺蟲效果，顯而易見，二至三天就可以看到蟲體的死亡或蟲隻數量降低，但枯草桿菌的殺菌或促進生長等作用卻不是短期內可以用肉眼觀察到。

Q14：枯草桿菌的毒性是否對人產生危害?

Ans：芽孢桿菌屬（Bacillus spp.）包含蘇力菌（Bacillus thuringiensis）、苔蘚桿菌（Bacillus licheniformis）、短小芽孢桿菌（Bacillus pumilis）、仙人掌桿菌（Bacillus cereus）與炭疽桿菌（Bacillus anthracis）。其中，仙人掌桿菌與炭疽桿菌，已知是對人類與動物有致病性，因此，鑑別正確菌種是一件非常重要的工作。一般而言，枯草桿菌和對人體沒有病原性的乳酸菌同屬安全菌株(GRAS,Generally Recognized as Safe ) 是屬於安全的菌種。在歐美日等多國早已有枯草桿菌的生物農藥核准上市，部份資料可參考美國環保部的下列網頁http://www.epa.gov/pesticides/biopesticides/ingredients/tech_docs/brad_006479.pdf

台灣目前也有枯草桿菌的生物農藥核准上市。依據目前的研究資料顯示，枯草桿菌對人類是安全的，但枯草桿菌的strains數目眾多，無法估算。如果菌種鑑定有誤或製作過程污染其他雜菌則可能發生未預期的作用。建議購買經政府核准的商品並依廠商使用說明施用，才有保障。因為目前政府的查驗登記制度都會針對生物活性、毒理影響與田間試驗等做嚴謹試驗評估，合格者才有核准字號。但不可否認，目前的市面上仍充斥許多未經核准的小型生物科技公司商品，用土壤添加劑或改良劑的名義而不用農藥的名義，規避農藥主管機關的查核，藥效不明確也不穩定，品質參差不齊，建議慎選使用。我也期待國內業者藉由合法化的設廠登記，取得產品合法的商品登記，以利將來市場行銷的運作。

Q15：您好，我曾經在電視上看到日本某公司將納豆菌結合水泥材料後， 置放於被污染的池水中來解決環境問題。請問這樣的技術是否困難？原因為何？台灣目前是否有人專注類似技術的開發？

Ans：納豆菌是枯草桿菌的一種，理論上，可產生澱粉分解酵素、蛋白質分解酵素、脂肪分解酵素、纖維素分解酵素及其他種類的分解酵素，因此能增加土壤肥力、飼料消化吸收率、水質清淨力、有機肥及廚餘或堆肥的發酵。另外，因為可以分泌產生至少一種以上的抑菌物質，能抑制土壤、水池、養殖池、雞舍、豬舍、牛舍、貓狗等寵物動物腸道的多種有害菌。常有廣告誇大，號稱能消除臭味，但依據部份農友施用後的反應，確實可降低臭味但無法完全消除。也有農友反應，用在養殖池，能減少池底污泥的累積。理論上，環境的應用是行得通，但效果緩慢，必須長期持續施用，而且台灣市場不大，所以研發在環境應用的產品很少，我上網搜尋到下列網址，您可參考 http://msbio.webdiy.com.tw/product-detail.asp?lang=1&pid=PD-061121-002751

中國大陸也有類似的產品上市，但台灣本土的文獻報告似乎蓼蓼可數。由於我這邊實驗室目前主要是進行枯草桿菌在農業作物病害的防治應用，有關環境保護或畜產方面的研發與應用是中長期目標，現階段我手邊的資料並不完整。建議您可聯絡農委會畜產試驗所或環保署等單位。

Q17：枯草桿菌可否與亞磷酸同時混合使用？

Ans：經查，農試所的安寶貞研究員在植物病理學會刊2001年12月（10卷4期）對於亞磷酸有詳細的說明。http://www.ceps.com.tw/ec/ecjnlarticleView.aspx?atliid=5317&issueiid=845&jnliid=397

摘錄部份內容如下：

亞磷酸原為緩效性磷肥的一種，1980年代被發現可以防治卵菌綱引起的植物病害。爾後，有關亞磷酸防治病害的作用與防病機制一直引起學者的興趣，至今仍在探討中。一般認為亞磷酸在高濃度下（1000ppm以上）對病菌的菌絲生長與產胞有干擾與抑制作用，有直接保護（direct protection）寄主的功效，但防病功效並不完全。近年來，許多報告均指出亞磷酸有誘導植物增強抗病性的間接防病（Indirect defense）的功效，它會加速植物抗禦素、酚化合物、或其他抗病物質的產生與量的累積。至於有關亞磷酸誘導寄主產生抗病反應的全程機制尚未完全了解，其正確切入抗病反應路徑的位置亦待求證。由於亞磷酸是強酸，水溶液的酸鹼值約為pH2-3，必須以鹼性物質中和至pH5.5-6.5後，才能施用於植物體。

我個人認為，由於枯草桿菌可以產孢，也能耐部份酸鹼，所以理論上應可以與調整酸鹼值過的亞磷酸混合使用，但尚未有農友反應過實際混合施用情形，而且枯草桿菌菌液內也含有多種抗生物質與酵素，有些酵素並不耐酸，在此仍建議暫時不要混合使用較適宜，以避免影響枯草桿菌的其它效果。

Q19：為什麼別人用有效，我用卻沒效？

Ans：要注意的是，不但植物病原菌會有差異，不同枯草桿菌菌株的有效成分種類與含量也有所不同，所以不同廠牌或公司生產的枯草桿菌製品的防治對象常不相同，防治效果也可能差異很大，而且廠商宣稱的某種病害防治效果不一定能完全適用於您的需求，也就是說，可能對別人有效卻對您沒效。

田間施用存有許多影響因素，例如，病原菌生理小種變異頻繁，必須與供應廠商或農業專家密切聯繫與詢問。

Q20：曾經聽過，一般枯草菌不適宜過量使用，適量有開根效果，過量反而抑制根部。這是真的嗎？

Ans：枯草桿菌的施用，一般是稀釋200至800倍，常見稀釋500倍，但必須視產品的標示而定。我曾經針對種子發芽做過測試，發現枯草桿菌濃度過高，會抑制某些作物的種子發芽。中興大學土壤系楊秋忠教授也曾經做過枯草桿菌等多種拮抗細菌對於作物的生長影響，其中有份研究報告也顯示發酵菌液濃度過高反而會抑制某些作物的生長。一般而言，只要產品品質優良且廠商規模夠大，都會標示建議稀釋的倍數。但必須強調的是，要有試驗數據作為基礎，不是濃度愈高愈好。

Q22：請問目前枯草桿菌有應用於水產或水族上的商品嗎？芽孢桿菌與枯草桿菌是否是相同的東西？

Ans：有些枯草桿菌或液化澱粉芽孢桿菌的菌株，可產生澱粉分解酵素、蛋白質分解酵素、脂肪分解酵素、纖維素分解酵素及其他種類的分解酵素，因此能增加水質清淨力。另外，因為可以分泌產生至少一種以上的抑菌物質，能抑制養殖池的多種有害菌，依據部份農友施用後的反應，用在養殖池，能減少池底污泥的累積。理論上，水產環境的應用是行得通，但效果非立即可見，必須長期持續施用。市面上已可以買到相關產品，但水產用藥並非農委會藥毒所的植物保護用藥之檢驗項目，相關水產用藥建議您與水產單位或水族用品店進一步聯繫與諮詢。

芽孢桿菌屬（Bacillus spp.）為屬名，屬名的後面為種名，即使同一屬但種名不同就代表不同的菌種，因此芽孢桿菌屬包含枯草桿菌（Bacillus subtilis）、液化澱粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）、蘇力菌（Bacillus thuringiensis）、苔蘚桿菌（Bacillus licheniformis）、短小芽孢桿菌（Bacillus pumilis）、仙人掌桿菌（Bacillus cereus）與炭疽桿菌（Bacillus anthracis）等。也就是說，枯草桿菌包含在芽孢桿菌屬內，枯草桿菌為芽孢桿菌的一種，但芽孢桿菌的範圍較大，芽孢桿菌不等於枯草桿菌。

尤其，仙人掌桿菌與炭疽桿菌，已知是對人類與動物有致病性，因此，鑑別正確菌種是一件非常重要的工作。一般而言，枯草桿菌、液化澱粉芽孢桿菌和對人體沒有病原性的乳酸菌同屬安全菌株(GRAS,Generally Recognized as Safe ) 是屬於安全的菌種。

市面上有些小型生物科技公司的枯草桿菌菌種並沒有經過專業機構的再確認，若有汙染雜菌或菌種來源有問題，就可能造成無法預測的害處。一般而言，只要經過政府或專業機構的鑑定，枯草桿菌與液化澱粉芽孢桿菌是對人體安全的。

Q23：枯草桿菌生長條件約在攝氏30度至37度左右，請問耐冷方面？如果溫度一直處於25度左右是否就停止生長，添加後是否只有暫時分解效果或者沒效果甚至過幾天菌種就會死亡？

Ans：一般而言，枯草桿菌的最適生長溫度為攝氏30度，但有些菌株為攝氏37度，至於每株菌株的最適生長溫度是必須由實驗尋找條件的。您提到的25度，在溫度較低的情況下枯草桿菌也會生長，只是可能生長速度會較慢。

用於堆肥或廚餘處理的菌種，大多為複合菌種，也就是說含有二種菌種以上，很少人只選擇添加枯草桿菌，也很少只添加一次，必須考慮不同菌種的特性而調整菌株的添加比例、添加時期、順序與次數。菌種是否會因其它因素死亡，例如廚餘或堆肥的其它可能抑菌成分、雜菌的菌株拮抗等，需專業測試。

堆肥體的初期溫度常大於60度，相關注意事項可參考台中區農業改良場的下列文章  http://info.organic.org.tw/supergood/ezcatfiles/organic/img/img/463/20080609-2.pdf

若枯草桿菌用於有機堆肥或生物肥料，則類似固態發酵，建議您可請教中興大學土壤系 楊秋忠 教授。

Q25：可否提供最簡單的枯草桿菌的製作方式？只要乾枯的稻草泡水幾天後就好了嗎？

Ans：乾枯的稻草可能含有枯草桿菌，也可能沒有含枯草桿菌，但重要的是很可能含有其它植物病原菌（有害菌）。

枯草桿菌的菌液製作必須用純的枯草桿菌，否則很容易因汙染雜菌而敗槽。許多人都誤以為枯草桿菌都是一樣的，事實上，同樣叫做「枯草桿菌」的菌種有成千上萬株，所謂「一樣米，養百樣人」，許多枯草桿菌菌株還要再經過學者專家測試防治植物病害效果的強弱與防治作物的種類進行評估，然後才能篩選出優良菌株並探討最適培養條件，進而開發為產品，決不是隨便找到一株枯草桿菌培養就能有效防治病害。

曾經有農友購買市面的枯草桿菌產品作菌種來自行DIY發酵菌液,，我並不建議農民買商品作菌種來自行DIY發酵菌液，因為商品的菌種應該很純沒錯，但發酵的條件農友如何穩定控制並不容易，若器具或容器消毒不完全會有雜菌產生，可能反而不利農作物健康，得不償失。

另外，菌種持續繼代培養，有可能造成部份特性與活性降低或喪失，甚至變異，所以菌種的保存與活化仍需專業監測。

尤其，發酵的培養液成分配方或比例、攪拌速度、培養天數與溫度等等，都會大大影響甚至降低枯草桿菌的有效成分含量，甚至每批DIY的效果參差不齊，所以仍建議您使用正規商品。若有大規模的使用量，可與農會或廠商討論您的需求.....

Q26：想請教是否所有「枯草桿菌」類的產品都可當作飼料添加劑使用呢? 以我的了解，有很多種「菌」都屬於枯草桿菌系列，市面上已經商業化量產的產品有的使用於外部環境的施用，有的使用於「土壤改良」，有的又稱作是「肥料」，而這些產品都號稱是「枯草桿菌」，但不知是否家禽類攝入體內有無不良影響?

Ans：枯草桿菌有殺菌的功能，所以可作為生物殺菌劑；有溶磷或產生IAA等功能，可促進作物生長，所以可作為生物肥料；可產生多種酵素，所以可作為動物飼料添加劑。但要注意的是，即使都是枯草桿菌，但枯草桿菌不同的菌株之間功能或強弱，常常差異很大，所以需要專業的篩選與評估，不建議直接拿同一種枯草桿菌產品施用於不同領域，因為不同領域的功能需要不同的培養液成分、發酵條件與製劑配方，也就是說生物肥料的配方並不適合直接用於食用飼料的添加，除非廠商提供多功能的數據與對該應用領域的安全測試報告（例如我的研究團隊所發展的多功能專利菌株http://tw.myblog.yahoo.com/biopesticides-hsieh/article?mid=3354&sc=1#3546

）否則不建議貿然使用。

至於菌株的安全性，建議參考下列網頁的Q14 http://tw.myblog.yahoo.com/biopesticides-hsieh/article?mid=495&prev=554&next=490&l=f&fid=38

與本網頁的Q22 http://tw.myblog.yahoo.com/biopesticides-hsieh/article?mid=2986&prev=3354&next=2658&l=f&fid=38

Q29：有用來鑑別Bacillus subtilis用的培養基嗎?或者是培養條件?

Ans：枯草桿菌沒有選擇性培養基。但枯草桿菌會產生內孢子，耐熱，因此可以將檢體溶於水中，接著加熱60℃30分鐘，一般不耐熱的雜菌會死亡，塗佈在Nutrient agar plate，能夠長出colony者，就具有產生內孢子的能力，但一般Bacillus 屬的細菌都會產孢，所以也有可能為蘇力菌、枯草桿菌、仙人掌桿菌等芽孢桿菌屬，所以必須再繼續用相位差顯微鏡與1000倍的油鏡觀察是否確實有產孢與結晶蛋白，結晶蛋白是蘇力菌的特色，若有，則是蘇力菌。若無結晶蛋白，要繼續鑑定芽孢桿菌菌種，建議用生化或分子生物等方法。可與新竹食工所或學校老師聯繫。

Q32：請問所有的枯草桿菌都可進入植物體與其共生嗎？ 還是只有蕈狀芽孢桿菌才行？  

Ans：根據國內外的研究文獻報告，不是每株枯草桿菌或蕈狀芽孢桿菌皆有植物內生的功能。

必須要有試驗數據證明是否有內生的功能，目前中興大學黃振文院長技轉給聯發生技公司的蕈狀芽孢桿菌菌株，據暸解具有植物內生的功能，至於國內其他菌株似乎尚無公開的植物內生試驗數據，建議您直接與菌株研發人洽詢。

農委會藥毒所我的研發團隊也於近年篩選到多株具有植物內生功能的液化澱粉芽孢桿菌。